¿Qué es la tripsina recombinante?  
La tripsina recombinante (rTrypsin) es una alterativa de origen no animal a la tripsina de origen animal. La tripsina recombinante hidroliza los enlaces peptídicos donde la porción carboxílica del enlace peptídico es aportado por la lisina (Lys) o la arginina (Arg).  
  
¿Novozymes ofrece tripsina recombinante en solución?  
No, la tripsina recombinante solo está disponible como producto sólido (granulado).  
  
¿Cuál es el tamaño de unidad de la tripsina recombinante que vende Novozymes? 
Ofrecemos tripsina recombinante en envases de 100 g y 1 kg.  

Muestras
¿Cómo obtener una muestra de tripsina recombinante? 
Para obtener una muestra de tripsina recombinante, haga clic en el enlace de comuníquese con nosotros en la parte superior de esta página. 

Manipulación y formulación  
¿Cómo conservar la tripsina recombinante?  
Se recomienda la conservación a una temperatura entre 0 °C y 25 °C (entre 32 °F y 77 °F). El envase debe conservarse intacto, seco y protegido de la luz solar. El producto funciona a la perfección si se conserva según las recomendaciones y se usa antes de la fecha de vencimiento. Cuando se formula el granulado de tripsina recombinante en forma de líquido, se recomienda congelar el líquido con la concentración final requerida y dividir la solución en pequeñas alícuotas para evitar el congelado y descongelado futuros.  
  
¿Qué amortiguador se necesita para disolver la tripsina recombinante? 
Se recomienda un amortiguador PBS ajustado con un pH de 7. Según la línea celular, la concentración recomendada de tripsina recombinante debe ajustarse a 0,2 mg/ml (correspondientes a 200 U/ml de tripsina recombinante con una actividad de 1000 USP/mg) y pasarse por un filtro estéril. Es necesario agregar EDTA para algunas líneas celulares. El agregado de EDTA suele acelerar la fase de disociación. 
Si se incuban células con una concentración de tripsina muy elevada durante mucho tiempo, se dañarán las membranas celulares y morirán las células. Si no está seguro de cuál es la concentración de tripsina que debe usar, use una concentración baja (0,02 % - 0,05 %).  
  
¿La tripsina recombinante contiene EDTA?  
La tripsina recombinante contiene un concentrado de enzimas, cloruro de sodio y aproximadamente 1 % de agua. El producto no contiene EDTA. El producto no contiene proteinasas indeseables, como carboxipeptidasa y quimotripsina.  
¿Cuál es la concentración de EDTA que puede agregarse para un buen desprendimiento?  
Depende de la línea celular, pero se recomienda de 0,5 mM a 1 mM de EDTA.  
  
Especificaciones
¿Cuál es la unidad de actividad de la tripsina recombinante de Novozymes?  
La unidad de actividad es USP/mg y el límite inferior es de 800 USP/mg.  
  
No estoy familiarizado con el cálculo de la unidad USP, ¿cuál es la correlación con la unidad BAEE?  
Las unidades USP se determinan de la siguiente manera:  
  
Unidad USP
Acata el método de Schwert y Takenaka* pero las actividades son 1/3 de las unidades de S y T (unidades BAEE). 
1 unidad USP cataliza un cambio en la absorbancia a 253 nm de 0,003 por minuto a 25 °, pH de 7,6 con éster etílico de N-benzoil-L-arginina (BAEE) como sustrato.  
*Schwert y Takenaka concibieron un método de valoración de la actividad tríptica con éster etílico de N-benzoil-L-arginina (BAEE) como sustrato. 1 unidad de S y T cataliza un cambio en la absorbancia a 253 nm de 0,001 por minuto a 25 °, pH de 7,6 en un volumen de reacción de 3,2 ml. 
1 unidad USP es equivalente a aproximadamente 3,0 unidades BAEE. 
  
Soporte técnico al cliente 
En general se utilizan rayos gamma en la tripsina de origen animal para garantizar la inactivación de los virus de origen animal. ¿Es necesario aplicar rayos gamma a la tripsina recombinante?  
La tripsina recombinante se fabrica con un proceso sin derivación de animales, por lo que no requiere la aplicación de rayos gamma.  
  
¿Cuál es el punto isoeléctrico (pI) de la tripsina recombinante? 
El pI es de 8,52 pero en nuestro laboratorio se midió un pI de 9,5 (una diferencia leve con respecto al pI teorético).  
  
¿Cuál es la especificidad de separación en comparación con la tripsina porcina? 
Nuestros científicos compararon la especificidad de separación de la tripsina recombinante con la de la tripsina porcina y hallaron que son muy similares. Ambos productos de tripsina se separan en presencia de R (arginina) y K (lisina).  
  
Asuntos normativos 
¿Cuáles son los estándares conforme a los cuales se produce la tripsina recombinante? 
La tripsina recombinante es un producto técnico fabricado conforme a las normas ISO. No se produce conforme a las BPF ni tiene grado farmacéutico.