O que é rTripsina?  
A tripsina recombinante (rTripsina) é uma alternativa de origem vegetal à tripsina derivada de animais. A rTripsina hidrolisa ligações peptídicas onde a parte carboxílica da ligação peptídica é contribuída tanto pela lisina (Lys) quanto pela arginina (Arg).  
  
A Novozyme fornece rTripsina em forma de solução?  
Não, rTripsina está disponível apenas como produto sólido (granulado).  
  
Em que tamanho de unidade a Novozymes vende rTripsina? 
A Novozymes oferece rTripsina em embalagens de 100g e 1 kg.  

Amostragem
Como posso conseguir uma amostra de rTripsina? 
Você pode conseguir uma amostra de rTripsina clicando no link de contato na parte superior desta página. 

Manuseio e formulação  
Como devo armazenar rTripsina?  
O armazenamento recomendado é de 0–25 °C (32–77 °F). A embalagem deve ser mantida intacta, seca e longe da luz solar. O produto funciona de forma ideal quando armazenado conforme recomendado e usado antes da data de validade. Ao formular o granulado rTripsina para uma forma líquida, recomendamos que você congele o líquido na concentração final necessária e divida sua solução em pequenas alíquotas, a fim de evitar futuros congelamentos e descongelamentos.  
  
Qual é o tampão necessário para dissolver rTripsina? 
É recomendado o uso de um tampão de PBS ajustado para pH 7. Dependendo da linhagem celular, a concentração sugerida de rTripsina deve ser ajustada para 0,2 mg/ml (correspondente a rTripsina de 200 U/ml com uma atividade de 1.000 USP/mg) e filtrada de forma estéril. Para algumas linhagens celulares, EDTA precisa ser adicionado. A adição de EDTA geralmente acelera a fase de dissociação. 
Incubando células com uma concentração de tripsina bem elevada durante um período de tempo muito longo danificará as membranas celulares e matará as células. Se não tiver certeza sobre a concentração de tripsina para o uso, use uma baixa concentração (0,02–0,05%).  
  
Há EDTA na rTripsina?  
rTripsina contém concentrado enzimático, cloreto de sódio e cerca de 1% de água. Não há EDTA no produto. O produto está livre de proteases indesejáveis, como carboxipeptidase e quimotripsina.  
Qual concentração de EDTA posso adicionar para uma boa separação?  
Depende da linhagem celular, mas é recomendado de 0,5 a 1 mM de EDTA.  
  
Especificações
Qual é a unidade de atividade da tripsina recombinante da Novozymes?  
A atividade da unidade é USP/mg e o limite inferior é 800 USP/mg.  
  
Não conheço o cálculo da unidade USP; como ele se corresponde à unidade BAEE?  
As unidades USP são determinadas da seguinte forma:  
  
Unidade USP
Adere ao método Schwert & Takenaka*, mas as atividades são 1/3 das unidades S&T (Unidades BAEE). 
1 unidade USP catalisa uma alteração na adsorvância a 253 nm de 0,003 por minuto a 25 °C, pH 7,6 usando éster etílico de N-benzoil-L-arginina (BAEE, na sua sigla em inglês) como substrato.  
*Schwert & Takenaka concebeu um método de ensaio para a atividade tríptica utilizando éster etílico de N-α-benzoil-L-arginina (BAEE) como substrato. 1 unidade S&T catalisa uma alteração na absorvância a 253 nm de 0,001 por minuto a 25 °C, pH 7,6 em um volume de reação de 3,2 ml. 
1 unidade USP é aproximadamente equivalente a 3,0 unidades BAEE. 
  
Suporte técnico ao cliente 
A irradiação gama é tipicamente realizada em tripsina de origem animal para garantir a inativação de qualquer vírus de origem animal. É necessário realizar irradiação gama na rTripsina?  
rTripsina é fabricada por um processo livre de origem animal, por isso não é necessário realizar irradiação gama na rTripsina.  
  
Qual é o PI (ponto isoelétrico) da rTripsina? 
O PI teórico é 8,52 mas nosso laboratório mediu o PI em 9,5 (uma leve diferença do PI teórico).  
  
Qual é a especificidade de clivagem em comparação com a tripsina porcina? 
Os cientistas da Novozymes compararam a especificidade de clivagem da rTripsina com a tripsina porcina e descobriram que a especificidade de clivagem da rTripsina era muito semelhante. Ambos os produtos de tripsina clivam após R (Arginina) e K (Lisina).  
  
Assuntos regulatórios 
De acordo com quais padrões rTripsina é produzida? 
rTripsina é um produto técnico fabricado de acordo com os padrões ISO. Ela não é produzida sob boas práticas de fabricação (BPF) e não é de grau farmacêutico.